影響高效液相色譜儀分離度的因素有色譜柱填充性能、流動(dòng)相和流速等。

一、色譜柱填充性能：

高效液相色譜柱的分離性能由固定相粒度、柱長(zhǎng)和柱壓降（由柱內(nèi)徑和柱填充狀況決定）決定，這三個(gè)參數(shù)度也決定了樣品組分的保留時(shí)間。保留時(shí)間不僅與色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素k有關(guān)，還與決定柱效和分離度的柱性能參數(shù)及流動(dòng)相的粘度有關(guān)，這些參數(shù)都是影響色譜分離過(guò)程動(dòng)力學(xué)的重要因素。

在高效液相色譜中，色譜柱的制備是一項(xiàng)技術(shù)要求非常高的工作。

二、流動(dòng)相：

高效液相色譜中，改變淋洗液組成和極性是改善分離的最直接因素，不可能通過(guò)增加柱溫來(lái)改善傳質(zhì)。因此，高效液相色譜大多是恒溫分析。流動(dòng)相選擇在高效液相色譜中顯得特別重要，流動(dòng)相可顯著改變組分的分離狀況。

三、流速：

流速大于0.5cm/s時(shí)，H－u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速，柱效提高不是很大。但在實(shí)際操作中，流量仍是一個(gè)調(diào)整分離度和出峰時(shí)間的重要參數(shù)。

   

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