電泳是電解質(zhì)中帶電粒子在電場作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。利用電泳現(xiàn)象對化學(xué)和生物化學(xué)組分進行分離的儀器稱為電泳儀。從20世紀(jì)30～40年代起，相繼發(fā)展了多種基于抗對流載體的電泳儀。傳統(tǒng)電泳儀由于受到焦耳熱的限制，只能在低電場強度下進行電泳，分離時間長，分離效率低。

傳統(tǒng)電泳根據(jù)有無載體可分為無載體電泳和載體電泳。無載體電泳是在液體介質(zhì)中進行電泳，有自由界面電泳。載體電泳是在固體介質(zhì)中進行電泳，載體的主要作用是防止電泳過程中的對流和擴散，使被分離物得到最大分辨率的分離，有紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS－PAGE電泳、瓊脂糖凝膠電泳、等電聚焦電泳和等速電泳等。

一、自由界面電泳：

1、原理：溶液在U型管中，根據(jù)樣品各組分泳動速度的不同進行分離。

2、特點：沒有載體，對流比較嚴重，組分不能完全分離，成分相互重疊，檢測困難。

3、應(yīng)用：目前很少用。

二、紙電泳：

1、載體：濾紙。

2、原理：由于載體孔徑大，沒有分子篩效應(yīng)，主要根據(jù)樣品各組分質(zhì)荷比的不同進行分離。

3、特點：濾紙結(jié)構(gòu)疏松，微孔較大，致使電泳速度慢，時間長，樣品擴散嚴重，分辨率低。

4、應(yīng)用：多用于核苷酸的分離。

三、醋酸纖維素薄膜電泳：

1、載體：醋酸纖維素薄膜。

2、原理：由于載體孔徑大，沒有分子篩效應(yīng)，主要根據(jù)樣品各組分質(zhì)荷比的不同進行分離。

3、與紙電泳相比的優(yōu)點：電滲影響小，化學(xué)惰性好，能將對流降到最小。

4、應(yīng)用：適用于蛋白質(zhì)和同工酶等的分離分析，特別適合病理情況下微量異常蛋白質(zhì)的檢測。

四、聚丙烯酰胺凝膠電泳：

1、載體：聚丙烯酰胺凝膠。

2、原理：質(zhì)荷比和分子篩效應(yīng)。

3、特點：機械強度好，透明有彈性，化學(xué)性能穩(wěn)定，無吸附作用，幾乎無電滲作用，可制成不同孔徑的凝膠，分辨率高。

4、應(yīng)用：用于蛋白質(zhì)和較小分子核酸的分離。

五、SDS－PAGE電泳：

1、載體：聚丙烯酰胺凝膠。

2、原理：分子篩效應(yīng)。

3、特點：樣品無需純化，操作簡便快速，重復(fù)性高。

4、應(yīng)用：目前測定蛋白質(zhì)亞基相對分子量的最好方法。

六、瓊脂糖凝膠電泳：

1、載體：瓊脂糖凝膠。

2、原理：分子篩效應(yīng)。

3、特點：凝膠孔徑大，對樣品吸附極微，分辨率高，重復(fù)性好。

4、應(yīng)用：用于核酸的分離。

七、等電聚焦電泳：

1、載體：聚丙烯酰胺凝膠等。

2、原理：利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子等電點的不同，在一個穩(wěn)定、連續(xù)、線性的pH梯度中進行分離。

3、特點：分辨率高，區(qū)帶清晰且窄，分辨率至少可達0.01 pH單位。

4、應(yīng)用：分離對象只限于蛋白質(zhì)和其它兩性分子，常用于同工酶的分離分析和pI測定。

八、等速電泳：

1、載體：聚丙烯酰胺凝膠等。

2、原理：用淌度比樣品中任何組分的淌度都大的電解質(zhì)作為先導(dǎo)電解質(zhì)，用淌度比樣品中任何組分的淌度都小的電解質(zhì)作為尾隨電解質(zhì)，樣品組分夾在先導(dǎo)電解質(zhì)和尾隨電解質(zhì)之間，根據(jù)各自淌度的不同進行分離。

3、特點：區(qū)帶界面明顯，具有富集和濃縮作用。

4、應(yīng)用：目前應(yīng)用不多。

   

來源：http://www.fudizao.com