反相鍵合相液相色譜儀流動相溶劑極性越低，洗脫能力越強(qiáng)。

一、常用流動相：

1、甲醇－水。

2、乙腈－水。

3、四氫呋喃－水。

溶劑強(qiáng)度為水＜甲醇＜乙腈＜四氫呋喃。

系統(tǒng)2較系統(tǒng)1好，原因如下：

系統(tǒng)2的粘度較系統(tǒng)1小，柱效好。粘度降低，柱壓降低，傳質(zhì)阻力降低（溶質(zhì)擴(kuò)散阻力降低）， 柱效升高。

乙腈的紫外末端吸收較甲醇小，在低波長處測定時，基線波動較甲醇小，測定誤差小。

二、流動相的選擇：

1、二元溶劑系統(tǒng)：

一般以洗脫能力最弱的水作為底劑，再加入一定量的可與水互溶的有機(jī)極性調(diào)節(jié)劑。常用的首選極性調(diào)節(jié)劑為甲醇和乙腈。

2、多元溶劑系統(tǒng)：

在二元溶劑系統(tǒng)中加入少量的四氫呋喃，常能改善某些難分離的物質(zhì)對的分離度。

用水、甲醇、乙腈和四氫呋喃組成三元或四元溶劑系統(tǒng)，并進(jìn)行優(yōu)化，選出最佳溶劑系統(tǒng)。

三、溶質(zhì)保留值隨溶劑極性變化的一般規(guī)律：

有機(jī)溶劑比例減小：

1、溶劑的極性增加，洗脫能力降低，溶質(zhì)的保留時間增加。

2、不同溶質(zhì)組分間的分離度增加。

3、溶質(zhì)的柱效降低。

   

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