高效凝膠色譜儀分析中不具有分配、吸附和離子交換作用,是基于樣品分子尺寸和形狀不同實(shí)現(xiàn)分離的。
一、工作原理:
小分子可以擴(kuò)散到凝膠空隙中通過(guò),出峰最慢。
中等分子只能通過(guò)部分凝膠空隙,中速通過(guò)。
大分子被排斥在外,出峰最快。
二、固定相:
1、半剛性凝膠:
為高交聯(lián)度的聚苯乙烯,孔徑范圍較寬。
常以有機(jī)溶劑作流動(dòng)相。
2、剛性凝膠:
為多孔硅膠。
可用水溶性溶劑和有機(jī)溶劑作流動(dòng)相。
可在較高壓強(qiáng)和較高流速下操作,但易拖尾。
三、流動(dòng)相:
常用流動(dòng)相有甲苯、苯、CH2Cl2、CHCl3、CCl4、四氫呋喃和水溶液等。
1、能溶解樣品。
2、不應(yīng)造成填料太大的溶脹和收縮。
3、控制pH和離子強(qiáng)度,可消除非排除機(jī)理的影響。
4、盡量降低溶劑粘度(加電介質(zhì))。
5、選擇與樣品折射率差別大的溶劑。
四、特點(diǎn):
1、樣品全部在溶劑的保留時(shí)間前洗脫。
2、色譜柱內(nèi)的峰擴(kuò)展較小。
3、.峰較窄,有利于檢測(cè)。
4、.采用示差檢測(cè)器。
五、不足:
1、峰容量小。
2、不能分離大小相似和分子量接近的樣品。
六、應(yīng)用:
適用于分子量不同的大分子樣品(Mr>2000)的分離。
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