高效液相色譜儀分析選擇流動相時應(yīng)注意的問題:
一、盡量使用高純度溶劑作流動相,防止微量雜質(zhì)長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。不純的溶劑會引起基線不穩(wěn),產(chǎn)生偽峰。
二、避免流動相與固定相發(fā)生作用而使柱效下降和損壞色譜柱,如使固定液溶解流失和酸性溶劑破壞氧化鋁固定相等。
三、樣品在流動相中應(yīng)有適宜的溶解度,防止產(chǎn)生沉淀并在柱中沉積。
四、流動相粘度低(粘度適中)。若使用高粘度溶劑,會增高壓力,不利于分離。常用低粘度溶劑有丙酮、甲醇和乙腈等。但粘度過低的溶劑也不宜采用,如戊烷等,它們?nèi)菀自谏V柱和檢測器內(nèi)形成氣泡,影響分離。
五、化學(xué)穩(wěn)定性好。
六、流動相應(yīng)滿足檢測器的要求。
對于紫外吸收檢測器,應(yīng)注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長長。所謂溶劑的紫外截止波長是指當小于截止波長的輻射通過溶劑時,溶劑對此輻射產(chǎn)生強烈吸收,此時溶劑被看作是光學(xué)不透明的,會嚴重干擾組分的吸收測量。
對于示差折光檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相,以達到最高靈敏度。
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