氣相毛細(xì)管柱色譜儀不分流進(jìn)樣是在氣相毛細(xì)管柱色譜儀進(jìn)樣前，分流閥將分流氣路關(guān)閉30～80s，待氣化的樣品基本或大部分進(jìn)入毛細(xì)管柱后打開(kāi)分流氣路，將殘留在氣化室中的樣品通過(guò)分流氣路放空。

分流進(jìn)樣是因?yàn)橹�容量小和樣品濃度高而不得不采用的方法，那么低濃度樣品采用不分流進(jìn)樣以提高分析靈敏度就是理所當(dāng)然的選擇了。實(shí)際工作中，不分流進(jìn)樣的應(yīng)用遠(yuǎn)沒(méi)有分流進(jìn)樣廣泛，只是在分流進(jìn)樣不能滿足分析要求時(shí)（主要是靈敏度要求），才考慮使用不分流進(jìn)樣。

一、結(jié)構(gòu)：

不分流進(jìn)樣與分流進(jìn)樣采用同一個(gè)進(jìn)樣口。不分流進(jìn)樣是將分流氣路的電磁閥關(guān)閉，使氣化的樣品基本或大部分進(jìn)入色譜柱。這樣既可提高分析靈敏度，又能消除分流歧視的影響。

1、載氣流路：

不分流進(jìn)樣時(shí)，在氣化室中氣化的含有大量溶劑的樣品不可能瞬間進(jìn)入色譜柱，溶劑峰會(huì)嚴(yán)重拖尾，使早流出組分的色譜峰被掩蓋在溶劑拖尾峰中，從而使分析變得困難甚至不可能。此現(xiàn)象稱為氣化室溶劑效應(yīng)。

（1）瞬間不分流進(jìn)樣：

進(jìn)樣開(kāi)始時(shí)關(guān)閉分流閥，使系統(tǒng)處于不分流狀態(tài)，待氣化的樣品基本或大部分進(jìn)入色譜柱后開(kāi)啟分流閥，使系統(tǒng)處于分流狀態(tài)，將殘留在氣化室中的溶劑氣體（包含小部分樣品組分）很快通過(guò)分流氣路放空，從而在很大程度上消除了溶劑峰拖尾現(xiàn)象。分流狀態(tài)一直持續(xù)到分析結(jié)束，注射下一個(gè)樣品時(shí)再關(guān)閉分流閥。

不分流進(jìn)樣并不是絕對(duì)不分流，而是分流與不分流相結(jié)合，確定瞬間不分流時(shí)間（又稱溶劑吹掃時(shí)間）往往是分析成敗的關(guān)鍵。

（2）瞬間不分流時(shí)間的確定原則：

瞬間不分流時(shí)間的確定依賴于樣品性質(zhì)、溶劑性質(zhì)、襯管容積、進(jìn)樣量、進(jìn)樣速度和載氣流速。

原則上講，這一時(shí)間應(yīng)足夠長(zhǎng)，保證絕大部分樣品進(jìn)人色譜柱，避免分流歧視的影響。同時(shí)又要盡可能短，最大限度地消除溶劑峰拖尾，使早流出峰的分析更為準(zhǔn)確。這顯然是矛盾的。實(shí)際工作中，瞬間不分流時(shí)間要根據(jù)樣品的具體情況（如溶劑沸點(diǎn)、待測(cè)組分沸點(diǎn)和濃度等）和操作條件確定，一般為30～80s，多用45s，可保證95%以上的樣品進(jìn)入色譜柱。

對(duì)于高沸點(diǎn)樣品，不分流時(shí)間長(zhǎng)些有利于提高分析靈敏度，而不影響分析準(zhǔn)確度。對(duì)于低沸點(diǎn)樣品，不分流時(shí)間要盡可能短些，最大限度地消除溶劑峰拖尾，以保證分析準(zhǔn)確度。

（3）確定瞬間不分流時(shí)間的方法：

首先確定溶解樣品的溶劑、襯管容積、進(jìn)樣量、進(jìn)樣速度和載氣流速。

開(kāi)始時(shí)可將這一時(shí)間設(shè)置的長(zhǎng)些（90～120s），以保證全部樣品組分進(jìn)入色譜柱。樣品進(jìn)行分析后，選擇一個(gè)待測(cè)組分的峰面積（該峰的k值應(yīng)大于5）作為測(cè)定指標(biāo)，該峰面積代表100%的樣品進(jìn)入了色譜柱。

然后逐步縮短不分流時(shí)間分別進(jìn)樣分析，計(jì)算同一組分在不同溶劑吹掃時(shí)間條件下的峰面積與第一次分析的峰面積之比，直到比值小于0.95，此時(shí)的不分流時(shí)間為最短時(shí)間。

再進(jìn)一步微調(diào)不分流時(shí)間，使同一組分的峰面積達(dá)到第一次分析時(shí)峰面積的95%～99%，此時(shí)的瞬間不分流時(shí)間即為最優(yōu)時(shí)間。

2、襯管：

（1）樣品在不分流襯管中的滯留時(shí)間取決于襯管形狀、襯管容積、氣體速度和樣品氣化時(shí)間。

最好采用直通式襯管。這主要是為了使樣品在氣化室中盡可能少稀釋，減小初始譜帶寬度。襯管容積小些有利，一般為0.25～1mL。

襯管內(nèi)徑比分流進(jìn)樣的小，最好使注射針緊貼在襯管內(nèi)孔的周?chē)�，阻止樣品反沖。

當(dāng)用自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣時(shí)，因進(jìn)樣速度快，樣品揮發(fā)快，建議采用容積稍大的直通式襯管。

有時(shí)采用錐形襯管，使樣品聚集到色譜柱上，阻止樣品反沖，減少樣品與金屬表面的接觸。

（2）對(duì)于干凈樣品，襯管內(nèi)可不填充玻璃棉。

（3）對(duì)于“臟”樣品，襯管內(nèi)要填充玻璃棉或石英玻璃棉，以促進(jìn)樣品氣化，保證分析重現(xiàn)性，防止不揮發(fā)性組分和機(jī)械雜質(zhì)進(jìn)入色譜柱，保護(hù)色譜柱不被污染。

（4）由于不分流進(jìn)樣時(shí)樣品在氣化室中的滯留時(shí)間比分流進(jìn)樣時(shí)長(zhǎng)，熱不穩(wěn)定化合物分解的可能性大，襯管和其中填充的石英玻璃棉都必須經(jīng)硅烷化處理，要及時(shí)清洗、更換和重新硅烷化。

3、柱溶劑效應(yīng)：

不分流進(jìn)樣時(shí)，初始柱溫比溶劑沸點(diǎn)低15～30℃，樣品在氣化室中氣化后，大量溶劑帶著組分流向低溫色譜柱并在柱上冷凝，冷凝在柱上的溶劑與固定液混合，形成比固定液膜厚幾倍的溶劑液膜（在柱入口附近最厚），組分蒸氣塞的前沿在溶劑膜上保留較強(qiáng)，隨著溶劑的揮發(fā)其后沿保留較弱，使峰變窄。此現(xiàn)象稱為柱溶劑效應(yīng)。

不分流進(jìn)樣時(shí)，要獲得良好的柱溶劑效應(yīng)必須滿足以下條件：

（1）溶劑峰一定要在被測(cè)組分峰之前流出。

（2）樣品沸點(diǎn)要足夠高，一般在150℃以上。

（3）要選擇適當(dāng)?shù)娜軇�，如二氯甲烷、氯仿、二硫化碳、己烷和異辛烷等。不宜使用極性和芳香烴溶劑，因?yàn)檫@些物質(zhì)的氣化溫度高，雖然宜在柱上冷凝，但在二次氣化時(shí)會(huì)損害原固定液膜，特別是非鍵合相柱。

（4）初始柱溫必須低于溶劑沸點(diǎn)15～30℃。

（5）進(jìn)樣量一般為1～10μL，常用2～3μL。

（6）樣品注射時(shí)間一般為3～15s。

二、特點(diǎn)：

1、優(yōu)點(diǎn)：

（1）有柱溶劑效應(yīng)時(shí)，減小了溶劑峰拖尾，組分峰接近溶劑拖尾峰，組分峰變窄。

（2）不分流進(jìn)樣是高沸點(diǎn)痕量樣品分析的首選方式。

對(duì)于高沸點(diǎn)樣品，不分流進(jìn)樣可以不考慮溶劑沸點(diǎn)，采用高的初始柱溫以縮短分析時(shí)間。

樣品幾乎（95%以上）全部進(jìn)入色譜柱，比分流進(jìn)樣相應(yīng)信號(hào)高1～3個(gè)數(shù)量級(jí)，特別適合稀釋樣品中痕量或超痕量組分的分析。

（3）對(duì)于沸程窄的樣品、極性大的生物樣品和要求進(jìn)樣量大的痕量分析，不分流進(jìn)樣比分流進(jìn)樣更有利。

（4）由于初始柱溫較低，有利于熱不穩(wěn)定化合物的分析。

（5）用于低濃度樣品。

（6）可注入較大體積的樣品。

（7）分流進(jìn)樣時(shí)，無(wú)論如何選擇實(shí)驗(yàn)條件，也無(wú)法克服樣品歧視，特別是高沸點(diǎn)組分失真更嚴(yán)重。而不分流進(jìn)樣基本克服了上述不足，定量相對(duì)誤差＜1.5%。

（8）適合程序升溫操作。

（9）分析靈敏度比分流進(jìn)樣高的多。

2、缺點(diǎn)：

（1）為了獲得較好的柱溶劑效應(yīng)，要采用柱程序升溫技術(shù)。

（2）實(shí)現(xiàn)柱溶劑效應(yīng)時(shí)，溶劑選擇有一定限制。

（3）柱溶劑效應(yīng)對(duì)難揮發(fā)性組分會(huì)造成峰展寬和畸變，早流出峰保留時(shí)間重復(fù)性欠佳。

（4）樣品初始譜帶比較寬（樣品氣化后的體積相對(duì)于柱內(nèi)載氣流量太大），溶劑峰嚴(yán)重拖尾，掩蓋早流出組分的色譜峰。

（5）實(shí)現(xiàn)柱溶劑效應(yīng)時(shí)，要根據(jù)溶劑性質(zhì)、初始柱溫、進(jìn)樣量、進(jìn)樣時(shí)間和載氣流量等反復(fù)選擇，建立分析方法試驗(yàn)比較費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且不宜掌握。

（6）若溶劑控制條件不當(dāng)，大量進(jìn)樣對(duì)常規(guī)液膜柱的液膜有溶解作用。

（7）操作條件優(yōu)化比較復(fù)雜，操作技術(shù)要求比較高。

三、操作參數(shù)：

1、分流閥打開(kāi)的時(shí)間：

打開(kāi)分流閥的目的是用大流量（50～150mL/min）迅速將氣化室中的殘余樣品蒸氣吹去。如不及時(shí)打開(kāi)分流閥，在分析過(guò)程中，殘余蒸氣可能不斷被載氣稀釋，使組分峰嚴(yán)重拖尾。分流閥的打開(kāi)時(shí)間要根據(jù)氣化溫度、載氣流量和進(jìn)樣量等確定，一般為30～90s，最優(yōu)時(shí)間通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。

2、氣化溫度：

氣化溫度可以比分流進(jìn)樣時(shí)稍低，因?yàn)椴环至鬟M(jìn)樣時(shí)樣品在氣化室中的滯留時(shí)間長(zhǎng)，氣化速度稍慢不會(huì)影響分離結(jié)果。氣化溫度的底限是能保證待測(cè)組分在瞬間不分流時(shí)完全氣化。氣化溫度過(guò)低會(huì)造成高沸點(diǎn)組分的損失，影響分析靈敏度和重現(xiàn)性。氣化溫度過(guò)高會(huì)造成樣品分解。因此，要根據(jù)樣品的具體情況確定氣化溫度。當(dāng)氣化溫度改變后，必須重新優(yōu)化設(shè)置瞬間不分流時(shí)間。

3、載氣流速：

從減小初始譜帶寬度的角度考慮，載氣流速大些有利。但流量太大，能使樣品蒸氣和載氣完全混合，溶劑在柱上冷凝困難，會(huì)降低或損失柱溶劑效應(yīng)。

4、隔墊吹掃氣流量：

隔墊吹掃氣流量較大時(shí)，可能造成樣品損失，對(duì)分析重復(fù)性有較大不利。可在進(jìn)樣時(shí)關(guān)閉隔墊吹掃氣路，在打開(kāi)分流閥時(shí)，同時(shí)也打開(kāi)隔墊吹掃氣路。

5、進(jìn)樣量：

進(jìn)樣量大些有利于形成或加大柱溶劑效應(yīng)。

進(jìn)樣量還和溶劑性質(zhì)、氣化溫度、襯管容積和進(jìn)樣速度有關(guān)，常用2～3μL。

6、樣品注射時(shí)間：

樣品注射時(shí)間對(duì)分析結(jié)果影響較小，一般為3～15s。注射速度快，樣品蒸氣反沖大，若隔墊吹掃氣流量大，會(huì)損失樣品。注射速度太慢，可能使樣品蒸氣和載氣充分混合而影響柱溶劑效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)表明，在保證分離的情況下，注射速度快些有利。

7、柱溫：

初始柱溫必須低于溶劑沸點(diǎn)15～30℃。

   

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