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高效毛細管電泳色譜儀分離分析模式 
(發(fā)布日期:2016-9-24 14:30:39) 來源:
 
   
高效毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進行分離,是分析科學繼高效液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,正成為生物樣品最重要的分離分析手段。CE分離分析模式有毛細管電色譜、毛細管區(qū)帶電泳、毛細管膠束電動色譜、毛細管凝膠電泳、毛細管等電聚焦電泳和毛細管等速電泳等。
一、毛細管電色譜:
1、固定相:色譜固定相。
2、原理:在毛細管中填充固定相顆粒、管壁鍵合固定相或制成連續(xù)床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)差異和本身淌度差異進行分離。
3、特點:分離效率比高效液相色譜高,選擇性比毛細管區(qū)帶電泳高,分析速度快,分析結果重復性好。
4、應用:是有發(fā)展前景的分離方法,填充毛細管電色譜在蛋白質分析中有重要潛力。
二、毛細管區(qū)帶電泳:
1、原理:根據(jù)樣品各組分質荷比的不同進行分離。
2、特點:是CE中最基本、應用最廣泛的一種分離模式。
3、應用:適用于分離蛋白質、多肽和帶電荷的大小分子。
三、毛細管膠束電動色譜:
1、原理:在電泳緩沖溶液中加入表面活性劑,當溶液中表面活性劑濃度超過臨界膠束濃度時,表面活性劑分子之間的疏水基團聚集在一起形成膠束,成為分離體系的準固定相,根據(jù)樣品各組分在水相和膠束相中的分配系數(shù)差異進行分離。
2、特點:可在分離離子型化合物的同時進行中性物質的分離。
3、應用:在各個領域顯示出廣泛的應用前景。
四、毛細管凝膠電泳:
1、載體:聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠,前者應用最多。
2、原理:分子篩效應。
3、特點:峰形尖銳,是CE中柱效最高的一種分離模式。
4、應用:用于測定核酸片斷和蛋白質相對分子量,是研究DAN排序的重要手段。
五、毛細管等電聚焦電泳:
1、原理:利用蛋白質分子或其它兩性分子等電點的不同,在一個穩(wěn)定、連續(xù)、線性的pH梯度中進行分離。
2、特點:分辨率高,區(qū)帶清晰且窄。
3、應用:可分離等電點差異小于 0.01pH單位的兩種蛋白質,特別適合分離相對分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。
六、毛細管等速電泳:
1、原理:用淌度比樣品中任何組分的淌度都高的電解質作為先導電解質,用淌度比樣品中任何組分的淌度都低的電解質作為尾隨電解質,樣品組分夾在先導電解質和尾隨電解質之間,根據(jù)各自有效淌度的不同進行分離。
2、特點:區(qū)帶界面明顯,具有富集和濃縮作用。
3、應用:目前應用不多。
   
來源:http://www.fudizao.com
   
 
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