高效毛細管凝膠電泳色譜儀（CGE）是20世紀(jì)80年代后期發(fā)展起來的毛細管電泳分離模式。它是將常規(guī)凝膠電泳儀對生物大分子的高效分離能力與毛細管電泳儀的快速、微量和定量分析相結(jié)合，是當(dāng)今分離度極高的一種分離技術(shù)。

電泳柱是CGE的關(guān)鍵部件，有凝膠柱和無膠篩分柱。

一、凝膠柱：

1、原理：

將聚丙烯酰胺等在毛細管中交聯(lián)生成網(wǎng)狀多孔凝膠，以凝膠作為載體進行電泳。由于凝膠多孔，具有類似分子篩的作用，荷質(zhì)比相等但大小不同的分子，在電場作用下發(fā)生遷移，其遷移速度受到凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的阻礙。大分子受到的阻力大，遷移速度慢，小分子受到的阻力小，遷移速度快，從而達到相互分離。

常用聚丙烯酰胺凝膠進行DNA片段分離和測序，用十二烷基硫酸鈉－聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS－PAGE）測定蛋白質(zhì)和肽的分子量。

2、特點：

（1）優(yōu)點：

1）聚丙烯酰胺凝膠是CGE的理想載體。由于聚丙烯酰胺凝膠粘度大，抗對流性好，散熱性好，能有效減小組分的擴散，因此能限制譜帶展寬，所得峰形尖銳，分離度極高，是CE分離模式中柱效最高的（10⁷TP/m）一種分離方法。

2）待測組分與聚丙烯酰胺凝膠可生成絡(luò)合物，使分離度增加，防止組分在毛細管壁的吸附，并減小電滲流，有可能使組分在短柱上實現(xiàn)極好的分離。

3）樣品用量少，可實現(xiàn)自動化，可用于大分子物質(zhì)的微量制備和餾分收集。

4）可分離從幾個到幾百萬個堿基對的DNA和蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)。

（2）缺點：

1）凝膠柱制備比較困難，使用壽命短。

2）進樣端易堵，若有氣泡則難以除去，影響分離。

二、無膠篩分柱：

1、原理：

將單體丙烯酰胺（Acr）溶液中的交聯(lián)劑N，N′－甲叉雙丙烯酰胺（Bis）的濃度降為零，得到低粘度線性非交聯(lián)的親水性聚合物溶液來代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺，仍有按分子大小分離的作用。

2、特點：

（1）優(yōu)點：

1）無膠篩分柱容易制備，功能可調(diào)節(jié)，使用方便，使用壽命長。

2）柱內(nèi)不作交聯(lián)反應(yīng)，可避免形成氣泡。

（2）缺點：

分離能力比凝膠柱差。

   

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