高效液相色譜儀流動(dòng)相的預(yù)處理包括流動(dòng)相過濾和脫氣等。

一、流動(dòng)相過濾：

所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45μm或0.22μm濾膜過濾，以除去雜質(zhì)微粒。色譜純?cè)噭┮膊焕�外，除非在�?biāo)簽上標(biāo)明已過濾。

用濾膜過濾時(shí)，要注意分清有機(jī)相（脂溶性）濾膜和水相（水溶性）濾膜。

有機(jī)相濾膜一般用于過濾有機(jī)溶劑，過濾水溶液時(shí)流速低或過濾不動(dòng)。

水相濾膜只能用于過濾水溶液，嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑。否則濾膜會(huì)被溶解，溶有濾膜的溶劑不得用于HPLC。

對(duì)于混合流動(dòng)相，可在混合前分別過濾。如需混合后過濾，首選有機(jī)相濾膜。現(xiàn)已有混合型濾膜。

二、流動(dòng)相脫氣：

1、流動(dòng)相脫氣的原因：

HPLC所用流動(dòng)相必須預(yù)先脫氣，否則容易在系統(tǒng)內(nèi)逸出氣泡，影響泵工作、柱分離效率、檢測(cè)器靈敏度和基線穩(wěn)定性，甚至無(wú)法檢測(cè)。

（1）流動(dòng)相中的溶解氧可能與樣品、流動(dòng)相甚至固定相（如烷基胺）反應(yīng)。

（2）溶解氧會(huì)引起溶劑pH變化，給分析結(jié)果帶來(lái)誤差。

（3）溶解氧能與某些溶劑（如甲醇和四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，此絡(luò)合物會(huì)提高背景吸收（特別是在260nm以下），導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度輕微降低，更重要的是在梯度洗脫時(shí)會(huì)造成基線漂移或形成鬼峰。除去溶解氧將大大提高UVD的性能。

（4）在熒光檢測(cè)中，溶解氧在一定條件下會(huì)引起淬滅現(xiàn)象，特別是對(duì)芳香烴、脂肪醛和酮等。在某些情況下，熒光響應(yīng)可降低達(dá)95%。除去溶解氧將改善在一些熒光檢測(cè)中的靈敏度。

（5）在電化學(xué)檢測(cè)中（特別是還原電化學(xué)法），溶解氧的影響更大。

2、常用脫氣方法：

有吹氦脫氣法、加熱回留法、超聲波脫氣法、抽真空脫氣法和在線真空脫氣法等。

   

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