高效液相色譜儀C18柱的性能指標(biāo)有硅膠純度、柱尺寸、顆粒形狀、粒徑、表面積、孔徑、鍵合類型、碳覆蓋率和封端等。
一、硅膠純度:
硅膠純度指填料硅膠的純度和殘留金屬離子的濃度。
A類硅膠由于帶負(fù)電荷的殘留硅羥基和酸性表面上金屬的含量高(硅羥基pKa低),導(dǎo)致堿性化合物發(fā)生拖尾。
B類硅膠(高純)由于金屬含量低,硅羥基pKa高,堿性化合物不發(fā)生拖尾。
二、柱尺寸:
柱尺寸指填料床的長(zhǎng)度和內(nèi)徑。
短柱(15~100mm):分析時(shí)間短,柱壓低。
長(zhǎng)柱(150~250mm):分辨率高,分析時(shí)間長(zhǎng)。
窄徑柱(≤2.1mm):靈敏度高。
寬徑柱(3~21.2mm):載樣量大。
三、顆粒形狀:
顆粒形狀有球型和不規(guī)則型。
當(dāng)使用粘度較大的流動(dòng)相時(shí),球型顆粒可降低柱壓,延長(zhǎng)色譜柱壽命。
四、粒徑:
粒徑指平均顆粒直徑。通常為3~10μm。
較小顆粒,柱效較高,但柱壓過(guò)高。
3.5μm顆粒常用于分離復(fù)雜的多組分樣品,組分單一的樣品多采用5μm顆粒。
五、表面積:
表面積指顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和。單位為m2/g。
表面積高的填料對(duì)多組分樣品具有較強(qiáng)的保留能力、柱容量和分離度。表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡,對(duì)梯度洗脫尤為重要。
六、孔徑:
孔徑指顆粒的孔或腔的平均尺寸。孔徑范圍為8~30nm。
大孔徑填料可延長(zhǎng)大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時(shí)間,達(dá)到充分分離,改善峰形,適用于大分子分析。
七、鍵合類型:
1、單體鍵合:
鍵合相分子與基體單點(diǎn)相連。
單齒鍵合傳質(zhì)速率高,色譜柱平衡快。
2、聚合體鍵合:
鍵合相分子與基體多點(diǎn)相連。
雙齒鍵合增加色譜柱穩(wěn)定性和載樣量。
八、碳覆蓋率:
碳覆蓋率指與基質(zhì)相連的鍵合相的量。
高碳覆蓋率:分辨率高,分析時(shí)間長(zhǎng)。
低碳覆蓋率:分析時(shí)間短。
九、封端:
封端指在固定相鍵合步驟后用短鏈將裸露的硅羥基鍵合并封閉起來(lái)。
封端可減輕待測(cè)組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的峰拖尾現(xiàn)象。
對(duì)極性樣品,未封端和經(jīng)過(guò)封端的色譜柱在選擇性上有明顯差異。
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