高效毛細(xì)管電泳色譜儀是以毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力，利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進(jìn)行分離，毛細(xì)管是分離的關(guān)鍵。

一、毛細(xì)管材質(zhì)：

理想的毛細(xì)管必須是化學(xué)和電惰性，能透過紫外和可見光，有一定的韌性，富有彈性，易于彎曲，耐用而且便宜。

目前使用的材質(zhì)有聚四氟乙烯、玻璃和石英等，其中石英最常用。熔融石英拉制的毛細(xì)管脆而易斷，外涂聚酰亞胺后會變得很有彈性。

1、聚四氟乙烯：可透紫外光，電滲很弱。但毛細(xì)管內(nèi)徑不均勻，對樣品有吸附，熱傳導(dǎo)差等。

2、玻璃：電滲最強，但雜質(zhì)含量較高。

3、石英：有天然和人造兩類，基本成分是二氧化硅。

二、毛細(xì)管內(nèi)徑：

石英毛細(xì)管內(nèi)徑通常為25～75μm，多采用50μm和75μm，毛細(xì)管電泳色譜有時用內(nèi)徑更大的毛細(xì)管。

1、小內(nèi)徑毛細(xì)管優(yōu)點：

（1）電流小，焦耳熱少，允許施加較高電壓。

（2）散熱面積大，能加快散熱，減小徑向擴散，保持電滲流型為扁平型，提高柱效。

2、小內(nèi)徑毛細(xì)管缺點：

（1）比表面積大，會增加溶質(zhì)的吸附作用。

（2）進(jìn)樣、檢測和清洗困難。

（3）檢測下限比大內(nèi)徑毛細(xì)管高。

三、毛細(xì)管外徑：

毛細(xì)管外徑為350～400μm。

通常有兩種規(guī)格，厚壁毛細(xì)管外徑為375μm，薄壁毛細(xì)管外徑為150μm。

四、毛細(xì)管壁厚：

毛細(xì)管壁厚包括石英本身壁厚和聚酰亞胺涂層厚度（熱導(dǎo)率很低）兩部分。

石英本身壁厚為150～375μm。

聚酰亞胺涂層厚度為12μm。

五、毛細(xì)管長度：

毛細(xì)管長度稱為總長度。根據(jù)分離度要求可選用20～100cm長度。

毛細(xì)管入口端至檢測器窗口的距離稱為有效長度。有效長度為80～100cm。

電場強度恒定時，理論塔板數(shù)與柱長成正比。但柱長不能無限增加，因為要使電場強度恒定，柱兩端須增加電壓。

電壓恒定時，柱長增加，可減少焦耳熱。但會降低電場強度，增加分析時間。

六、毛細(xì)管檢測窗口：

毛細(xì)管的聚酰亞胺涂層不透明，檢測窗口部位的聚酰亞胺必須剝離除去，剝離長度為2～3mm。

常用剝離方法有硫酸腐蝕法、灼燒法和刀片刮除法。

七、毛細(xì)管溫度控制：

毛細(xì)管中充入緩沖溶液，柱兩端分別置于兩個緩沖池中。電泳過程中，由于焦耳熱效應(yīng)會降低分離效率，環(huán)境溫度的變化會導(dǎo)致分離重現(xiàn)性不好。因此，毛細(xì)管應(yīng)置于溫度可調(diào)的恒溫環(huán)境中，控溫方式有風(fēng)冷控溫和液冷控溫。

1、風(fēng)冷控溫：

通過強制空氣對流控制毛細(xì)管的分離溫度。

2、液冷控溫：

將毛細(xì)管置于恒溫液體中控制毛細(xì)管的分離溫度。

八、毛細(xì)管壁改性：

毛細(xì)管壁改性主要是為了消除吸附和控制電滲流，通常采用表面涂層和動態(tài)修飾。

1、毛細(xì)管壁表面涂層（管壁靜態(tài)改性）：

涂層方法有物理涂布法和化學(xué)涂層法。最常用的方法是采用雙官能團(tuán)的偶聯(lián)劑，如各種有機硅烷，第一個官能團(tuán)（如甲氧基）與管壁上的游離羥基進(jìn)行反應(yīng)，使其與管壁進(jìn)行共價結(jié)合，再用第二個官能團(tuán)（如乙烯基）與涂漬物（如聚丙烯酰胺）進(jìn)行反應(yīng)，形成穩(wěn)定的涂層。此外，還有纖維素、聚乙烯亞胺和聚醚組成的多層涂層、親水性的絨毛涂層和聯(lián)鎖聚醚涂層等。

2、毛細(xì)管壁動態(tài)修飾（管壁動態(tài)改性）：

動態(tài)修飾是改變緩沖溶液和加入添加劑。如陽離子表面活性劑十四烷基三甲基溴化銨（TTAB），在管壁形成物理吸附層，使電滲流反向。添加劑還有聚胺、聚乙烯亞胺（PEI）和甲基纖維素等。甲基纖維素（MC）可形成一中性親水性覆蓋層。

   

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