影響反相液相色譜儀ODS柱性能的因素有色譜柱物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)。

一、色譜柱物理性質(zhì)：

1、硅膠純度：

硅膠純度指填料硅膠的純度和殘留金屬離子的濃度。

A類硅膠由于帶負(fù)電荷的殘留硅羥基和酸性表面上金屬的含量高（硅羥基pK_a低），導(dǎo)致堿性化合物發(fā)生拖尾。

B類硅膠（高純）由于金屬含量低，硅羥基pK_a高，堿性化合物不發(fā)生拖尾。

2、柱尺寸：

柱尺寸指填料床的長(zhǎng)度和內(nèi)徑。

短柱（15～100mm）：分析時(shí)間短，柱壓低。

長(zhǎng)柱（150～250mm）：分辨率高，分析時(shí)間長(zhǎng)。

窄徑柱（≤2.1mm）：靈敏度高。

寬徑柱（3～21.2mm）：載樣量大。

3、顆粒形狀：

顆粒形狀有球型和不規(guī)則型。

當(dāng)使用粘度較大的流動(dòng)相時(shí)，球型顆粒可降低柱壓，延長(zhǎng)色譜柱壽命。

4、粒徑：

粒徑指平均顆粒直徑。通常為3～10μm。

較小顆粒，柱效較高，但柱壓過(guò)高。

3.5μm顆粒常用于分離復(fù)雜的多組分樣品，組分單一的樣品多采用5μm顆粒。

5、表面積：

表面積指顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和。單位為m²/g。

表面積高的填料對(duì)多組分樣品具有較強(qiáng)的保留能力、柱容量和分離度。表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡，對(duì)梯度洗脫尤為重要。

6、孔徑：

孔徑指顆粒的孔或腔的平均尺寸。孔徑范圍為8～30nm。

大孔徑填料可延長(zhǎng)大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時(shí)間，達(dá)到充分分離，改善峰形，適用于大分子分析。

二、色譜柱化學(xué)性質(zhì)：

1、鍵合類型：

（1）單體鍵合：

鍵合相分子與基體單點(diǎn)相連。

單齒鍵合傳質(zhì)速率高，色譜柱平衡快。

（2）聚合體鍵合：

鍵合相分子與基體多點(diǎn)相連。

雙齒鍵合增加色譜柱穩(wěn)定性和載樣量。

2、碳覆蓋率：

碳覆蓋率指與基質(zhì)相連的鍵合相的量。

高碳覆蓋率：分辨率高，分析時(shí)間長(zhǎng)。

低碳覆蓋率：分析時(shí)間短。

3、封端：

封端指在固定相鍵合步驟后用短鏈將裸露的硅羥基鍵合并封閉起來(lái)。

封端可減輕待測(cè)組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的峰拖尾現(xiàn)象。

對(duì)極性樣品，未封端和經(jīng)過(guò)封端的色譜柱在選擇性上有明顯差異。

   

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