高效毛細(xì)管電泳儀的毛細(xì)管內(nèi)徑很小，對進(jìn)樣技術(shù)要求很高，進(jìn)樣區(qū)帶寬度約是毛細(xì)管柱長的1%～2%，不能引入顯著的區(qū)帶擴(kuò)張，以確保系統(tǒng)的高效；樣品量必須＜100nL，否則易造成過載。進(jìn)樣方式有電動進(jìn)樣、壓力進(jìn)樣和擴(kuò)散進(jìn)樣。

一、電動進(jìn)樣（電遷移進(jìn)樣）：

毛細(xì)管洗凈后，用微量注射器注入緩沖液，然后將其兩端分別浸入兩個盛有緩沖液的儲瓶。電動進(jìn)樣時，將含樣品溶液的儲瓶代替一端的緩沖液儲瓶，通過樣品溶液引入進(jìn)樣電壓（為分離電壓的1/5～1/3），電路按一定時間周期接通，一般是幾秒鐘接通一次，使進(jìn)入毛細(xì)管的樣品區(qū)帶變窄。然后斷電，將緩沖液儲瓶代替樣品溶液瓶，再通入高壓電，使電泳開始。為使電壓沿管線分布均勻，應(yīng)使樣品溶液與緩沖液的電導(dǎo)率相近。

1、進(jìn)樣質(zhì)量：

當(dāng)毛細(xì)管的進(jìn)樣端浸入樣品溶液并加上電場E時，組分因電泳和電滲作用而進(jìn)入毛細(xì)管內(nèi)。在時間t內(nèi)，進(jìn)入毛細(xì)管的樣品質(zhì)量Q為：

Q =πr²（v_ep + v_eo）Ct

= πr²（μ_ep + μ_eo）ECt

= πr²（μ_ep + μ_eo）VCt/L

式中：r為毛細(xì)管內(nèi)徑，V為毛細(xì)管兩端的電壓，L為毛細(xì)管總長度，C為樣品濃度。

電動進(jìn)樣的控制參數(shù)是電場強(qiáng)度E和進(jìn)樣時間t。其中E通常為1～10kV/60cm；t通常為1～10s，有時可達(dá)60s或更大。

2、特點：

（1）優(yōu)點：

1）電動進(jìn)樣對毛細(xì)管內(nèi)的填充介質(zhì)沒有限制，屬普適性進(jìn)樣方法，可實現(xiàn)自動化操作。

2）進(jìn)樣裝置簡單。

3）適用于荷電樣品進(jìn)樣，特別適合粘度大的樣品。

4）電動進(jìn)樣是毛細(xì)管凝膠電泳的唯一進(jìn)樣方式。因為在凝膠狀態(tài)下，壓力進(jìn)樣和擴(kuò)散進(jìn)樣都很困難。

5）可用于痕量富集。但樣品溶液的離子強(qiáng)度必須保持恒定，否則在該點的電壓會急劇變化。

（2）缺點：

電動進(jìn)樣對離子組分存在偏向，淌度大的離子比淌度小的離子的進(jìn)樣量大，淌度大且與電滲流方向相反的離子可能進(jìn)不去，而降低分析的準(zhǔn)確性和可靠性。

二、壓力進(jìn)樣（氣動進(jìn)樣）：

壓力進(jìn)樣要求毛細(xì)管內(nèi)的填充介質(zhì)具有流動性，當(dāng)毛細(xì)管兩端置于不同的壓力環(huán)境中時，管內(nèi)溶液流動，將樣品引入。

1、進(jìn)樣動力：

進(jìn)樣動力有進(jìn)樣端加壓（正壓）、出口端抽真空（負(fù)壓）和虹吸（重力）。

（1）進(jìn)樣端加壓：

采用壓縮空氣（鋼瓶氣）可實現(xiàn)正壓進(jìn)樣，并可與毛細(xì)管清洗系統(tǒng)共用。多采用。

（2）出口端抽真空：

負(fù)壓進(jìn)樣要求控制設(shè)計特別精密，否則容易因泄露等原因出現(xiàn)不重復(fù)進(jìn)樣。

（3）虹吸：

調(diào)節(jié)進(jìn)樣槽和出口槽之間的相對高度使之產(chǎn)生虹吸作用，將樣品引入。

2、進(jìn)樣質(zhì)量：

壓力進(jìn)樣時，在時間t內(nèi)，進(jìn)入毛細(xì)管的樣品質(zhì)量Q為：

Q =（ΔP×πr⁴Ct）/（8ηL）

式中：r為毛細(xì)管內(nèi)徑，L為毛細(xì)管總長度，ΔP為管兩端的壓力差，C為樣品濃度，η為管內(nèi)溶液粘度。

電動進(jìn)樣的控制參數(shù)是管兩端的壓力差ΔP和進(jìn)樣時間t。其中ΔP通常為0～3450Pa；t通常為1～5s，有時可達(dá)60s或更大。

利用重力進(jìn)行虹吸進(jìn)樣時，ΔP正比于毛細(xì)管進(jìn)、出口液面的相對高度ΔH，進(jìn)樣量也可由ΔH控制。

ΔP = ρgΔH

式中：ρ為緩沖液密度；g為重力加速度；ΔH通常為5～20cm，多取10cm，對應(yīng)的t多為5～10s。

ΔH大，進(jìn)樣快速，但毛細(xì)管上下移動幅度大，不利于精確控制，也不利于儀器的設(shè)計。

3、特點：

（1）優(yōu)點：

1）進(jìn)樣量與組分的淌度無關(guān)，不存在電動進(jìn)樣中的歧視效應(yīng)。進(jìn)樣量不受樣品基質(zhì)的影響，應(yīng)用廣泛。

2）若嚴(yán)控樣品粘度和溫度，則進(jìn)入毛細(xì)管的樣品質(zhì)量恒定。

（2）缺點：

壓力進(jìn)樣選擇性差，樣品和背景同時被引入毛細(xì)管內(nèi)，對后續(xù)分離可能產(chǎn)生影響。

三、擴(kuò)散進(jìn)樣：

利用濃度差擴(kuò)散原理，當(dāng)將毛細(xì)管浸入樣品溶液時，樣品分子因在毛細(xì)管管口界面存在濃度差而向管內(nèi)擴(kuò)散。

1、進(jìn)樣質(zhì)量：

擴(kuò)散進(jìn)樣時，在時間t內(nèi)，進(jìn)入毛細(xì)管的樣品質(zhì)量Q為：

Q = 400CS（2Dt）^1/2

式中：D為樣品分子的擴(kuò)散系數(shù)，C為樣品濃度。

擴(kuò)散進(jìn)樣動力是不可控制參數(shù)，進(jìn)樣量僅由擴(kuò)散時間t控制，t通常為10～60s。

利用電動或壓力進(jìn)樣系統(tǒng)，取E = 0或ΔP = 0（如果允許），可實現(xiàn)擴(kuò)散進(jìn)樣。

2、特點：

（1）擴(kuò)散進(jìn)樣對毛細(xì)管內(nèi)的填充介質(zhì)沒有限制，屬普適性進(jìn)樣方法。

（2）擴(kuò)散進(jìn)樣具有雙向性，在樣品分子進(jìn)入毛細(xì)管的同時，區(qū)帶中的背景物質(zhì)也向管外擴(kuò)散，可得到畸變程度較小（與背景差別不大）的初始區(qū)帶，可抑制背景干擾，提高分辨率。擴(kuò)散與遷移速度和方向無關(guān)，可抑制進(jìn)樣偏向，提高定性和定量分析的可靠性。

   

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