高效色譜儀分析的展開方法有洗脫法、頂替法和迎頭法。
一、洗脫法:
1、工作原理:
組分與固定相之間的作用力>流動相與固定相之間的作用力。
流動相在固定相上的吸附或溶解能力比樣品組分中任何一個組分的吸附或溶解能力要弱得多。由于各組分在固定相上的吸附或溶解能力不同,被流動相沖洗出來的次序也不同,從而使各組分得到分離。
2、特點:
色譜柱所發(fā)揮的分離效能較高,色譜峰清晰,比較適合多組分混合物的分離,并容易從被分離組分中除去洗脫劑而獲得純度較高的物質。因此,洗脫法是最常用的展開方法。
二、頂替法:
1、工作原理:
組分與固定相之間的作用力<流動相與固定相之間的作用力。
在流動相中加入對固定相的吸附或溶解能力比樣品組分中任何一個組分的吸附或溶解能力要強的物質為頂替劑或直接用頂替劑作流動相,通過色譜柱,將各組分按吸附或溶解能力的強弱順序,依次頂替出固定相。吸附或溶解能力最弱的組分最先流出,最強的最后流出。
2、特點:
適用于純物質制備和濃縮分離某一組分。但是經(jīng)一次使用后,色譜柱被樣品或頂替劑飽和,必須更換色譜柱或除去被色譜柱吸附的物質后,才能再使用。
三、迎頭法:
1、工作原理:
以樣品本身作流動相,將樣品連續(xù)通過色譜柱,在固定相上吸附或溶解能力最弱的組分,首先以純物質狀態(tài)流出,其次流出的是第一組分和次弱組分的混合物。依次類推。
2、特點:
在分離多組分混合物時,除第一組分外,其余均是非純態(tài),因此僅適用于從含有微量雜質的混合物中分離出一個高純組分,而不適用于對混合物進行分離。
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