高效毛細(xì)管電泳儀(HPCE)是以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進(jìn)行分離,是分析科學(xué)繼高效液相色譜儀之后的又一重大進(jìn)展,使分析科學(xué)從微升級進(jìn)入到了納升級水平,不僅使單細(xì)胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子分析有了新的轉(zhuǎn)機(jī)。
一、柱效高:
理論塔板數(shù)高,柱長,且進(jìn)樣端和檢測端都無死體積,故柱效高。
二、靈敏度高:
樣品經(jīng)毛細(xì)管電泳分離后,用激光誘導(dǎo)熒光檢測器和安培型電化學(xué)檢測器均可檢測至10ˉ19 mol/L,甚至可達(dá)10ˉ21mol/L,即可檢測到幾個至幾十個分子及單細(xì)胞,故HPCE-LIFD被稱為分子光譜的指紋識別法。
三、速度高:
由于小內(nèi)徑(25~75μm)毛細(xì)管具有高電阻,能使用高電場(100~500V/cm),使分離效率提高,分離時間縮短。通常只需幾十秒至幾十分鐘內(nèi)可完成分離。芯片HPCE則更快,能以秒計(jì)算。
四、電泳性質(zhì)高度特異:
由于毛細(xì)管電泳性質(zhì)的高度特異性,使混合物可進(jìn)行電泳分析,甚至結(jié)晶純化的樣品也可在電泳分析中分出兩個或更多的電泳區(qū)帶。
五、電泳方法溫和:
由于毛細(xì)管電泳方法的溫和性,對不穩(wěn)定的生物大分子的分離純化有時比如沉淀、離心和色譜等其它方法更可靠、更方便。
六、進(jìn)樣量少:
毛細(xì)管容積小,如一根75μm×100cm毛細(xì)管的容積僅為4.4μL,50μm×50cm毛細(xì)管的容積不足1μL。
進(jìn)樣量可少到1μL,消耗體積在1~50nL。
七、運(yùn)行成本少:
只需少量的流動相和低廉的毛細(xì)管。
八、易實(shí)現(xiàn)高自動化:
HPCE是目前自動化程度最高的分離分析方法之一。
九、應(yīng)用范圍廣:
幾乎可分離除揮發(fā)性和難溶之外的各種物質(zhì)。
來源:http://www.fudizao.com