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高效毛細(xì)管電泳儀常見問題解決方案 
(發(fā)布日期:2016-3-1 11:20:02) 來源:
 
   
高效毛細(xì)管電泳儀常見問題解決方案:
一、無電泳峰:
1、檢查結(jié)果:沒有電流。
可能原因:毛細(xì)管堵塞或斷裂。
解決方案:用水沖洗毛細(xì)管,觀察是否有水流出。若無水流出,拆下卡盒檢查毛細(xì)管兩端和窗口是否斷裂。若毛細(xì)管沒斷裂,可用水反向高壓沖洗。緩沖液需過濾,將樣品過濾或離心去除其中的顆粒。
2、檢查結(jié)果:電流波動(dòng)很大,甚至幾乎消失。
可能原因:緩沖液中有氣泡產(chǎn)生或區(qū)帶中樣品析出。
解決方案:將緩沖液超聲脫氣,如果還有此現(xiàn)象發(fā)生,則可能是區(qū)帶中樣品析出,可降低樣品濃度。對(duì)于在緩沖液中溶解度不高的樣品,需在緩沖液中加入添加劑。
3、檢查結(jié)果:電流初始值較小,后逐漸增大。
可能原因:樣品進(jìn)樣量過大。
解決方案:減少進(jìn)樣量。
4、檢查結(jié)果:電流正常。
可能原因:樣品濃度過低。
解決方案:使用高濃度樣品測試,如果無法解決則有可能是以下其它原因。
5、檢查結(jié)果:電流正常。
可能原因:檢測波長設(shè)置不正確。
解決方案:確認(rèn)被分析物的特征吸收,檢查檢測波長設(shè)置。
6、檢查結(jié)果:電流正常。
可能原因:分離極性錯(cuò)誤。
解決方案:對(duì)于蛋白質(zhì)樣品,注意蛋白質(zhì)在分離條件下其PI和所帶電荷。對(duì)于核酸樣品,通常條件下會(huì)帶負(fù)電荷。
7、檢查結(jié)果:電流正常。
可能原因:樣品在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附。
解決方案:對(duì)于蛋白質(zhì)和核酸樣品,應(yīng)盡量采用涂層毛細(xì)管、極端pH條件或動(dòng)態(tài)涂層,防止樣品吸附。
8、檢查結(jié)果:電流正常。
可能原因:光學(xué)檢測器或光纖損壞。
解決方案:進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)樣品測試,如果沒有對(duì)應(yīng)結(jié)果出現(xiàn),則可能存在硬件問題。
二、電泳峰拖尾:
1、可能原因:毛細(xì)管窗口未開或窗口位置不正。
解決方案:打開毛細(xì)管檢測窗口或調(diào)整窗口位置。
2、可能原因:樣品在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附。
解決方案:對(duì)于蛋白質(zhì)和核酸樣品,應(yīng)盡量采用涂層毛細(xì)管、極端pH 條件或動(dòng)態(tài)涂層,防止樣品吸附。
三、電泳峰不對(duì)稱:
1、可能原因:毛細(xì)管入口切口不平齊。
解決方案:重新切割毛細(xì)管入口。
2、可能原因:緩沖溶液與樣品溶液電解率差別過大。
解決方案:采用緩沖液作為樣品溶劑。
四、電泳峰過寬:
1、檢查結(jié)果:降低樣品進(jìn)樣量,有改善。
可能原因:樣品濃度太大。
解決方案:可降低樣品濃度或減少進(jìn)樣量。
2、檢查結(jié)果:降低樣品進(jìn)樣量,無改善。
可能原因:樣品本身性質(zhì)不均一。
解決方案:此原因主要是針對(duì)蛋白質(zhì)樣品,小分子樣品發(fā)生的概率較低。
五、遷移時(shí)間不穩(wěn)定:
1、檢查結(jié)果:出峰時(shí)間不穩(wěn)定且無規(guī)律。
可能原因:緩沖液與毛細(xì)管內(nèi)壁平衡較慢。
解決方案:每次樣品運(yùn)行之間避免用NaOH沖洗毛細(xì)管。
2、檢查結(jié)果:出峰時(shí)間依次后延。
可能原因:樣品中物質(zhì)易在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附。
解決方案:首先在每次樣品運(yùn)行之前用0.1N NaOH溶液短時(shí)間沖洗毛細(xì)管,觀察遷移時(shí)間能否重復(fù)。如果效果不佳,使用涂層毛細(xì)管或?qū)悠吩俅翁幚怼?/DIV>
六、峰形和出峰時(shí)間不穩(wěn)定:
1、檢查結(jié)果:更換緩沖液種類,峰形和出峰時(shí)間穩(wěn)定。
可能原因:緩沖液不穩(wěn)定、易電解或樣品在原緩沖液條件下不穩(wěn)定。
解決方案:更換其它種類的緩沖液。
2、檢查結(jié)果:更換緩沖液種類,峰形和出峰時(shí)間仍不穩(wěn)定。
可能原因:樣品中物質(zhì)易在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附。
解決方案:采用涂層毛細(xì)管或?qū)悠愤M(jìn)行前處理。
七、電流泄漏:
1、檢查結(jié)果:毛細(xì)管斷裂。
可能原因:毛細(xì)管內(nèi)緩沖液流出,造成電流泄漏。
解決方案:更換毛細(xì)管,并用水清洗光纖頭和檢測窗口。
2、檢查結(jié)果:毛細(xì)管無斷裂。
可能原因:實(shí)驗(yàn)環(huán)境濕度過大。
解決方案:使用抽濕機(jī)或空調(diào)。濕度過大時(shí),可在儀器關(guān)閉時(shí)放置干燥劑,但儀器運(yùn)行時(shí)一定要將干燥劑取出。
八、無法加氣壓:
1、檢查結(jié)果:更換后問題解決。
可能原因:瓶頸處有液體,導(dǎo)致瓶塞易滑。
解決方案:向瓶中裝液體時(shí)不要過滿,也不要沾濕瓶頸。
2、檢查結(jié)果:若瓶塞無問題,可先采用真空方式,若真空方式可使用,但壓力仍不可用。
可能原因:壓力系統(tǒng)存在問題。
解決方案:檢修。
九、遷移時(shí)間可重復(fù),但峰面積重復(fù)性不好:
1、檢查結(jié)果:重新切割毛細(xì)管入口,問題解決。
可能原因:毛細(xì)管入口切口不平齊。
解決方案:重新切割毛細(xì)管入口。
2、檢查結(jié)果:重新切割毛細(xì)管入口,問題仍然存在。
可能原因:若電動(dòng)進(jìn)樣可保持重現(xiàn),則壓力控制或氣路存在問題。
解決方案:檢修。
十、毛細(xì)管或電極易折斷:
1、可能原因:瓶蓋老化。
解決方案:換瓶蓋。
2、可能原因:電極不垂直。
解決方案:將電極拉直。
十一、冷卻液泄漏:
1、可能原因:卡盒內(nèi)墊圈和卡子漏裝或裝錯(cuò)順序。
解決方案:嚴(yán)格按安裝順序安裝。
2、可能原因:儀器內(nèi)部管路密封不嚴(yán)。
解決方案:檢修。
   
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