影響高效液相色譜儀C18柱性能的因素有硅膠純度、柱尺寸、顆粒形狀、粒徑、表面積、孔徑、鍵合類型、碳覆蓋率和封端等。
一、硅膠純度：
硅膠純度指填料硅膠的純度和殘留金屬離子的濃度。
A類硅膠由于帶負電荷的殘留硅羥基和酸性表面上金屬的含量高（硅羥基pKa低），導(dǎo)致堿性化合物發(fā)生拖尾。
B類硅膠（高純）由于金屬含量低，硅羥基pKa高，堿性化合物不發(fā)生拖尾。
二、柱尺寸：
柱尺寸指填料床的長度和內(nèi)徑。
短柱（15～100mm）：分析時間短，柱壓低。
長柱（150～250mm）：分辨率高，分析時間長。
窄徑柱（≤2.1mm）：靈敏度高。
寬徑柱（3～21.2mm）：載樣量大。
三、顆粒形狀：
顆粒形狀有球型和不規(guī)則型。
當使用粘度較大的流動相時，球型顆粒可降低柱壓，延長色譜柱壽命。
四、粒徑：
粒徑指平均顆粒直徑。通常為3～10μm。
較小顆粒，柱效較高，但柱壓過高。
3.5μm顆粒常用于分離復(fù)雜的多組分樣品，組分單一的樣品多采用5μm顆粒。
五、表面積：
表面積指顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和。單位為m2/g。
表面積高的填料對多組分樣品具有較強的保留能力、柱容量和分離度。表面積低的填料通常能迅速達到平衡，對梯度洗脫尤為重要。
六、孔徑：
孔徑指顆粒的孔或腔的平均尺寸。孔徑范圍為8～30nm。
大孔徑填料可延長大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間，達到充分分離，改善峰形，適用于大分子分析。
七、鍵合類型：
1、單體鍵合：
鍵合相分子與基體單點相連。
單齒鍵合傳質(zhì)速率高，色譜柱平衡快。
2、聚合體鍵合：
鍵合相分子與基體多點相連。
雙齒鍵合增加色譜柱穩(wěn)定性和載樣量。
八、碳覆蓋率：
碳覆蓋率指與基質(zhì)相連的鍵合相的量。
高碳覆蓋率：分辨率高，分析時間長。
低碳覆蓋率：分析時間短。
九、封端：
封端指在固定相鍵合步驟后用短鏈將裸露的硅羥基鍵合并封閉起來。
封端可減輕待測組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的峰拖尾現(xiàn)象。
對極性樣品，未封端和經(jīng)過封端的色譜柱在選擇性上有明顯差異。
來源：http://www.fudizao.com
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