高效毛細(xì)管電泳儀簡(jiǎn)稱毛細(xì)管電泳儀(CE),是以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進(jìn)行分離,是分析科學(xué)繼高效液相色譜儀之后的又一重大進(jìn)展,使分析科學(xué)從微升級(jí)進(jìn)入到納升級(jí),應(yīng)用十分廣泛。
一、DNA分析:
DNA分析包括堿基、核苷、核苷酸、寡核苷酸、引物、探針、單鏈DNA、雙鏈DNA(DNA片段和PCR產(chǎn)物)和DNA序列分析。CZE和MECC通常用于堿基、核苷酸和簡(jiǎn)單的核苷酸等分析,CGE用于較大的寡核苷酸、ssDNA、dsDNA和DNA序列分析。
二、蛋白質(zhì)和肽分析:
CE在蛋白質(zhì)和肽的應(yīng)用可概括為兩方面:一是結(jié)構(gòu)表征,二是研究相互作用。CE已廣泛用作最有效的純度檢測(cè)手段,可檢測(cè)出多肽鏈上單個(gè)氨基酸的差異。CIEF測(cè)定等電點(diǎn),分辨度可達(dá)0.01pH單位。用CE-MS聯(lián)用進(jìn)行肽譜分析,可推斷蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)。用CE進(jìn)行蛋白質(zhì)本身反應(yīng)及和小分子相互作用研究是研究熱點(diǎn),蛋白質(zhì)和DNA分析始終是CE研究的重點(diǎn),今后會(huì)有更多的研究。
三、手性化合物分析:
手性對(duì)映體分析和鑒定有巨大的應(yīng)用價(jià)值,已成為醫(yī)藥領(lǐng)域的一個(gè)重要課題。除CIEF外,其余五種模式均可用于手性分析。CE進(jìn)行手性分析,通常在緩沖液中加入手性選擇劑,操作和分離效率均優(yōu)于HPLC手性分析。今后CE手性分析將會(huì)在發(fā)展更多的手性選擇劑、更深入地探討分離機(jī)理、手性藥物在體內(nèi)的作用及代謝等方面開展研究。
四、藥物分析和臨床檢測(cè):
目前,CE在藥物和臨床研究領(lǐng)域已成為不可缺少的有力手段,但在醫(yī)藥領(lǐng)域尚未確定為法定方法,故未得到廣泛使用。醫(yī)藥領(lǐng)域內(nèi)大量研究工作表明,CE正在走向成熟。CE-MS聯(lián)用也將促進(jìn)CE快速發(fā)展。CE在臨床化學(xué)中除進(jìn)行臨床分子生物學(xué)檢測(cè)外,也廣泛用于疾病臨床診斷、臨床蛋白質(zhì)分析、臨床藥物檢測(cè)和藥物代謝研究。藥物代謝研究對(duì)CE是一個(gè)挑戰(zhàn),在提高靈敏度和解決蛋白質(zhì)吸附等方面有待改進(jìn)。
五、環(huán)境監(jiān)測(cè)和離子分析:
CE在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用也日趨增多,目前主要集中在用各種模式包括CEC分離檢測(cè)土壤等環(huán)境樣品中的多環(huán)芳烴,10min內(nèi)可分離16種多環(huán)芳烴。CE在環(huán)境監(jiān)測(cè)中應(yīng)用還需提高靈敏度、發(fā)展?jié)饪s和富集方法。
CE比較重要的應(yīng)用還有糖的分析,目前最成功的是用APTS作糖的衍生化試劑,標(biāo)記后用LIFD進(jìn)行單糖和多糖的測(cè)定。
六、單細(xì)胞和單分子檢測(cè):
單細(xì)胞和單分子檢測(cè)是CE分析的最高境界,對(duì)生命科學(xué)和化學(xué)具有巨大的潛在意義。單細(xì)胞監(jiān)測(cè)或許會(huì)對(duì)細(xì)胞水平的藥理學(xué)和了解生命過程提供一種活體檢測(cè)手段。
CE是正在發(fā)展的技術(shù),有很多理論和實(shí)際問題有待解決,將在不斷解決難題的過程中得到發(fā)展。
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