高效液相色譜儀分析中影響液相微萃取效率的因素有萃取劑、萃取劑體積、樣品溶液pH值、鹽效應(yīng)、萃取時(shí)間、攪拌速度和溫度等。
一、萃取劑:
液相微萃取的萃取效果和使用的萃取劑密切相關(guān),選擇合適的有機(jī)溶劑是提高萃取效率的關(guān)鍵。萃取劑選擇的基本原則是根據(jù)相似相溶原理。
1、分析物在萃取劑中的溶解度越大,萃取效果越好。
2、萃取劑的揮發(fā)性小,在水相中的溶解度應(yīng)盡可能小,以減小溶劑損失。
3、萃取劑必須是毒性小和對(duì)環(huán)境危害小的溶劑。
4、在進(jìn)行后序色譜分析時(shí),溶劑必須易于與分析物分離。
5、對(duì)于項(xiàng)空液相微萃取,溶劑還需有較高的沸點(diǎn)和較低的蒸氣壓,以減少在萃取過程中的揮發(fā)。
6、對(duì)于中空纖維液相微萃取,溶劑的選擇更為重要。所選用的溶劑除滿足萃取劑的選擇基本原則外,還要與纖維有良好的親和力(能穩(wěn)定存在于多孔孔隙中)和有適當(dāng)?shù)恼扯龋ǚ乐挂驍U(kuò)散而損失)。
二、萃取劑體積:
一般來說,液滴體積越大,分析物的萃取量越大,有利于提高靈敏度。但由于分析物進(jìn)入液滴是擴(kuò)散過程,液滴體積越大,萃取速度越小,達(dá)到平衡所需的時(shí)間越長。
三、樣品溶液pH值:
在液相微萃取過程中,分析物的疏水性越大,離子化程度越低,其水溶性越小,在有機(jī)相中的分配系數(shù)越大。而化合物的離子化程度不僅受其本身電離常數(shù)(電離部分與未電離部分平衡時(shí)的常數(shù))的影響,也受其所在溶液的pH值影響。為了得到更好的萃取效果,提高分析物在有機(jī)相中的分配系數(shù),通常是通過調(diào)整樣品溶液的pH值來提高分析物在有機(jī)相中的分配系數(shù)。
四、鹽效應(yīng):
由于分析物在萃取劑和樣品之間的分配系數(shù)受樣品基體的影響,當(dāng)樣品基體發(fā)生變化時(shí),分配系數(shù)也發(fā)生變化。通過向樣品中加入一些無機(jī)鹽類(如NaCl 和Na2SO4等),可增加溶液的離子強(qiáng)度,增大分配系數(shù),從而提高分析物在有機(jī)相中的分配,這是提高靈敏度的有效途徑。
鹽效應(yīng)是有機(jī)萃取中提高萃取效率常用的方法。但對(duì)于某些體系,在其中加入鹽對(duì)萃取效果沒有影響,甚至可能降低萃取效果。
五、萃取時(shí)間和攪拌速度:
液相微萃取是目標(biāo)分析物在樣品與萃取劑之間分配平衡的過程,萃取效率與時(shí)間長短有關(guān)。在達(dá)到平衡前,目標(biāo)分析物的萃取量隨著萃取時(shí)間的延長而增大,一般來說,萃取時(shí)間越長,萃取效果越好。增加攪拌速度可加速分析物由樣品溶液向萃取劑中擴(kuò)散,提高萃取速度,縮短水溶液與萃取劑之間的平衡時(shí)間,減小萃取劑的溶解損失。
對(duì)于中空纖維液相微萃取,為了獲得較高的回收率,可適當(dāng)延長萃取時(shí)間。但萃取時(shí)間不能太長,否則中空纖維壁孔中的有機(jī)相會(huì)損失,萃取效率反而降低。所以要嚴(yán)格控制萃取時(shí)間,既保證萃取效率最大,又能得到良好的實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性,萃取時(shí)間一般為30~60min。此外,可通過快速攪拌來增加擴(kuò)散系數(shù),提高萃取速度和回收率,但攪拌速度不能太高,否則易產(chǎn)生氣泡并吸附在中空纖維表面,促使溶劑揮發(fā),而降低萃取效率。
六、溫度:
一般來說,溫度對(duì)液相微萃取有兩方面的影響:溫度升高,分析物向萃取劑的擴(kuò)散速度增大,對(duì)流加強(qiáng),有利于縮短達(dá)到平衡的時(shí)間。但是,升溫會(huì)使分析物的分配系數(shù)減小,導(dǎo)致其在萃取劑中的萃取量減少。所以,實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)兼顧萃取時(shí)間和萃取效果,尋找最佳的工作溫度。
七、其它:
樣品溶液的粘度和基質(zhì)種類等也會(huì)影響萃取速度和回收率。
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