高效液相色譜儀化學(xué)鍵合固定相是采用硅膠表面鍵合技術(shù)對(duì)硅膠微粒表面進(jìn)行修飾(硅烷化),使硅膠表面帶有不同的功能團(tuán)而形成的固定相。目前在色譜填料中,鍵合相占78%左右(其中C18占反相色譜的72%),硅膠占10%左右。
一、硅酸酯型鍵合相(≡Si-O-C):
最先用于液相色譜的健合相。
醇與硅羥基進(jìn)行酯化反應(yīng)制得。
鍵合相的有機(jī)表面是一些單體,具有良好的傳質(zhì)特性。但這些酯化過(guò)的硅膠易水解且受熱不穩(wěn)定,因此僅適用于不含水或醇的流動(dòng)相。
以弱極性溶劑洗脫,分離極性化合物。
二、硅氮型鍵合相(≡Si-N):
先用酰氯將硅羥基氯化,再與氨基化合物反應(yīng)制得。
可用非極性和強(qiáng)極性溶劑作流動(dòng)相。
三、硅碳型鍵合相(≡Si-C):
將硅膠表面氯化后,使Si-Cl鍵轉(zhuǎn)化為Si-C鍵,將有機(jī)基團(tuán)直接鍵合在硅膠表面上。此反應(yīng)不方便。
當(dāng)使用水溶液時(shí),必須限制pH = 4~8范圍內(nèi)。
四、硅氧烷型鍵合相(≡Si-O-Si-C):
目前應(yīng)用最廣泛的鍵合相。
硅羥基與有機(jī)氯硅烷或烷氧基硅烷反應(yīng)制得。
具有相當(dāng)?shù)哪蜔嵝院突瘜W(xué)穩(wěn)定性,在pH = 2~8.5范圍內(nèi)對(duì)水穩(wěn)定,有機(jī)分子與載體間結(jié)合牢固,固定相不易流失。
例十八烷基硅烷鍵合相(ODS或C18)是最常用的非極性鍵合相,用于反相色譜,在70℃以下和pH = 2~8范圍內(nèi)可正常工作。
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