高效液相色譜儀紫外可見吸收檢測(cè)器（UVD）屬于選擇性檢測(cè)器，是高效液相色譜中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器。高效液相色譜中約75%的檢測(cè)器是UVD（其中50%是多波長(zhǎng)，25%是PDAD）。

一、結(jié)構(gòu)與原理：

高效液相色譜流通池內(nèi)樣品的濃度與吸光度的關(guān)系遵循Beer定律：

A = ㏒（I₀/I）=εbc

式中：A為吸光度，I₀為入射光強(qiáng)度，I為透射光強(qiáng)度，ε為樣品的摩爾吸光度，b為流通池的光程長(zhǎng)度，c為樣品濃度。

UVD常用氘燈作光源，裝有一個(gè)光柵型單色器，有兩個(gè)流通池，一個(gè)是參比池，另一個(gè)是測(cè)量池。

氘燈發(fā)射出紫外－可見區(qū)范圍的連續(xù)波長(zhǎng)的光，波長(zhǎng)選擇范圍為190～800nm。光線照射到全息凹面光柵上，衍射的單色光照射到半透射反光鏡上被分成兩束，一束經(jīng)測(cè)量池后照射到測(cè)量光電池上，另一束經(jīng)參比池后照射到參比光電池上。若兩個(gè)流通池都通過純的均勻溶劑，則它們?cè)谧贤夤庀聨缀鯚o吸收，兩個(gè)光電池上接收到的輻射強(qiáng)度相等，即無信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測(cè)量池時(shí)，吸收一定的紫外光，使兩個(gè)光電池接收到的輻射強(qiáng)度不等，即有信號(hào)輸出，輸出信號(hào)大小與組分濃度成正比。

二、特點(diǎn)：

1、波長(zhǎng)可選。

2、靈敏度高。

3、噪聲低，線性范圍寬。

4、對(duì)流動(dòng)相的溫度和流速變化不敏感。

5、適用于梯度洗脫，可用于制備。

6、能與多種檢測(cè)器串聯(lián)使用。

三、不足：

1、對(duì)紫外吸收差的化合物（如不含不飽和鍵的烴類等）靈敏度很低。

2、流動(dòng)相的選擇受到一定限制。

（1）紫外吸收大的溶劑不能做流動(dòng)相。

每種溶劑都有截止波長(zhǎng)，當(dāng)小于該截止波長(zhǎng)的紫外光通過溶劑時(shí)，溶劑的透光率降至10%以下，因此，流動(dòng)相的截止波長(zhǎng)不能大于UVD的工作波長(zhǎng)。用截止波長(zhǎng)以上至少5～10nm作為工作波長(zhǎng)。

（2）緩沖鹽、離子對(duì)試劑和胺改性劑也會(huì)有影響。

四、應(yīng)用：

對(duì)大部分有機(jī)物有響應(yīng)。

   

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