色譜儀是利用不同樣品組分與固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)的差別，當(dāng)兩相做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，各組分在兩相之間進(jìn)行多次分配，使各組分達(dá)到相互分離。色譜分離的內(nèi)因是樣品各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同，外因是流動(dòng)相與固定相之間的相對(duì)運(yùn)動(dòng)。

色譜儀的液體固定相均勻地涂著在色譜柱載體上，流動(dòng)相連續(xù)不斷地流經(jīng)其間，兩相充分接觸，但不相溶。當(dāng)樣品剛進(jìn)入色譜柱時(shí)，由于樣品分子與兩相分子之間的相互作用，樣品既可以進(jìn)入固定相，又可以返回流動(dòng)相。當(dāng)樣品進(jìn)入流動(dòng)相時(shí)，隨流動(dòng)相一起沿柱床向前移動(dòng)。當(dāng)樣品進(jìn)入固定相時(shí)，被滯留而不再向前移動(dòng)。組分與固定相作用力越大，越容易進(jìn)入固定相，向前移動(dòng)的速度越慢。組分與流動(dòng)相作用力越大，越容易進(jìn)入流動(dòng)相，向前移動(dòng)的速度越快。這樣經(jīng)過(guò)一定柱長(zhǎng)后，由于反復(fù)多次（10³～10⁶次）分配，即使原來(lái)性質(zhì)（如沸點(diǎn)、溶解度、分子結(jié)構(gòu)和極性等）差異微小的組分，也能達(dá)到很好的分離。結(jié)果，與流動(dòng)相作用力大的組分先從色譜柱中流出來(lái)，與固定相作用力大的組分后流出，從而使樣品各組分得到分離。

   

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