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超高速冷凍離心機測定生物大分子沉降系數(shù)的方法 
(發(fā)布日期:2014-9-16 17:06:29) 來源:http://www.fudizao.com
 
   
生物大分子的沉降系數(shù)是一個很重要的物理化學(xué)參數(shù),可用超高速冷凍離心機的界面移動法測定。
超高速冷凍離心機的界面移動法可采用單扇形杯,使用Schlieren光學(xué)系統(tǒng),將生物大分子樣品溶液充注到分析池后,在離心力場的作用下,生物大分子在池中離開氣液彎月面,從而測定其沉降速度。若樣品為蛋白質(zhì)溶液,可配置成1mg/mL濃度,在加入到分析池前,樣品預(yù)先對緩沖液進行透析。另一只平衡用的單扇形杯加入緩沖液,其彎月面應(yīng)與樣品充注杯一樣高。離心轉(zhuǎn)速的選擇應(yīng)以該目標(biāo)蛋白質(zhì)分子能在1.5~2小時內(nèi)完全沉降到池底為準(zhǔn)。離心時間確定后,調(diào)節(jié)光電掃描或照相時間間隔,使之在整個實驗時間內(nèi)能掃描或照相6~10次。然后對Schlieren圖進行分析計算,得出沉降系數(shù)值。
 
來源:http://www.fudizao.com
 
 
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